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胎牛血清保存要点(2024年新手适用)

点击次数:79   发布时间:2024/2/29 9:36:39

胎牛血清的作用:
胎牛血清是细胞培养中用量比较多的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有为重要的功能。

血清保存要点:
1.需要保存的血清必须储存于-20℃-70℃的低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月,由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻于低温冰箱,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或者玻璃瓶冻裂。

2.热灭活是指56℃,30分钟加热已解冻的血清,加热过程中须规则摇晃均匀,此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

3.瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

4.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。

5.血清中的沉淀物,絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”,常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。
 
6.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量保存/运输:-5°C~-20°C。

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原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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